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SOP文件 | 白细胞WBC手工法计数操作规程及临床意义

检验君 检验星空 2021-12-15

检测原理:
用稀醋酸溶液,将血液稀释一定倍数并破坏红细胞后,滴入计数盘中,在显微镜下计数一定范围中的白细胞数,并经换算即可求得每升血压计液中各种白细胞的总数。
目的:根据白细胞的高低变化,协助各种相关疾病的诊断。
检测试剂:
1%Hcl:浓盐酸1ml加10g/L美蓝(或结晶紫)数滴加蒸馏水至100ml.醋酸可溶解红细胞;美蓝(或结晶紫)可使白细胞核略为着色,并易与红细胞稀释液区别。
检测仪器:显微镜;血细胞计数盘;微量吸管。
标本采集及处理: EDTA抗凝血或手指血。
1、采血步骤
1)登记:登记的内容包括病人的姓名,病历号,采血时间,登记编号,医生姓名,送检部门等。
2)识别病人:问清病人并识别病人是至关重要的。
3)病人的体位:坐位采血;卧位采血;采血时病人的口中不准含食物、口香糖等,以防意外。
4)选择适当的静脉,最宜采血的肘窝静脉,也可在腕,手,踝静脉采血。
2、注意事项:
1)病人宜处于休息状态,并且在早餐前采血(乳糜血影响检测结果)。
2)针头不应小于21GAVGE。国际推荐用21G1.5或20G1.5号针头,确保针头与空针联接牢固,以免产生泡沬。
3)抽血时要“一针见血”,如抽血过慢或不太顺利,将会影响检测结果。
4)取样完毕,立即与抗凝剂充分混合,混合抗凝标本时需轻微的但彻底的混匀,一般轻轻的翻转5至10次,要避免用力振摇,以免标本溶血影响结果。
3抗凝剂的选择EDTA抗凝
4 标本的送检
1)标本采取前先将标本编号贴在采血管上,采血后应进行核对。
2)标本应带盖存放;存贮时间为2-8℃<4小时;因此取血后应及时送至实验室,以免检测结果受到影响。
5标本处理
(1) 检验人员收到标本后应首先逐个检查其是否符合检验要求。如果不符合检验要求的标本需通知临床重新采血。
(2) 包括抽血量不标准(过多或过少)、目测发现采血管中存在小血丝或小血块,如果排除病人体内自身溶血的情况,人为造成的溶血标本以及重度乳糜血的标本等。
(3)核对化验单申请检验项目,编号登记。
操作步骤:
1、取清洁小试管1支,加入稀释液0.38ml
2、75%酒精将皮肤消毒后待干,穿刺皮肤,第一滴血弃去并准确采血20ul,吹入上述试剂并吸上清液洗试管数次,混匀
3、混匀后,以吸管吸取混悬液充入计数池中,静止2-3分钟
4、用低倍镜计数四个大格所有白细胞数
5、计数完毕,计数盘和盖玻片及时用水冲洗然后用细绒布拭净
计算:白细胞/L={(四大格内白细胞总数)/4}×10×20×106
式中:  ÷4: 即得每大格白细胞平均数
×10: 由每大格细胞数换算为每微升细胞数
×106由1微升换算成1升,因为1L=106μl
×20: 血液稀释倍数
参 考 值成人:(4~10) x 109/L
  新生儿: (15~20) x109/L
  6月~2岁: (11~12) x 109/L
临床意义:

1、生理变化 

1)年龄因素:新生儿的白细胞数较高,一般在1520)×10L,以后下降至成人水平。

2)日间变化:一般人在安静时白细胞较低,活动和进餐后较高;午后高于清晨,一日之内白细胞的最高值与最低值之间可相差一倍。

3)运动、疼痛和情绪的影响:一般脑力劳动和体力劳动、冷热水浴、日光和紫外线照射均可使白细胞升高。

(4)妊娠孕妇中晚期白细胞可达(12-17)×10L,分娩时最高可达34×10L

2、白细胞总数病理性增多

1)急性感染:金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌等化脓感染,如败血症、急性风湿、扁桃体炎、阑尾炎等。

2)急性中毒:急性化学药物如安眠药、敌敌畏等中毒,以及代谢性中毒如糖尿病酮症酸中毒及慢性肾炎尿毒症,常见白细胞增多。

3)急性大出血:特别是体内出血如脾破裂或宫外孕输卵管破裂后,白细胞迅速增高。

4)白血病及恶性肿瘤:急慢性粒细胞白血病时常见白细胞增多,恶性肿瘤晚期,特别是消化道恶性肿瘤,白细胞数增高。

3、白细胞总数病理性减少

1)某些感染:有些革兰氏阴性杆菌感染,如伤寒、副伤寒杆菌感染时,如无并发症,白细胞均减少。某些病毒、某些疟原虫亦可使白细胞减少。某些自身免疫性疾病,如系统性红斑狼疮等。

2)再生障碍性贫血:红、白细胞及血小板均明显减少,呈“三少”现象。

3)机体长期接触放射线及接受放疗、化疗的患者,因抑制骨髓细胞的有丝分裂而致使白细胞减少。

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