CAR-T免疫基因疗法又叫CAR-T细胞免疫疗法，是含免疫治疗、基因治疗与细胞治疗的前沿医疗手段。首先将人工构建的相应嵌合抗原受体（CAR）基因导入T细胞，在CAR的引导下，CAR-T细胞特异性靶向目标抗原细胞，发挥对目标细胞的攻击，其识别目标抗原无HLA限制性。因此，与 TCR-T技术相比，此技术的优势在于不需要开发许多不同的HLA等位基因，此外，由于HIV 辅助蛋白nef能下调细胞表面的HLA，而CAR-T技术避开了这一不利条件。此技术已在治疗癌症尤其是白血病临床试验上取得了显著成效，同时也在治疗HIV/AIDS临床试验中显示出了巨大潜力。

事实上，首例CAR-T临床试验的CAR是由CD4细胞外结构域与细胞内CD3-ζ信号结构域相连构成的CD4-ζ CAR。其作用机制主要是：由于CD4是HIV感染细胞的主要受体，CD4-ζ CAR的CD4细胞外结构域通过结合位于感染细胞表面的HIV外膜蛋白 gp120来模拟免疫突触，导致CD4-ζ CAR-T细胞活化，进而裂解HIV感染细胞。

体外实验表明：CD4-ζ CAR-T细胞能够抑制病毒复制并杀灭病毒感染的细胞。临床试验表明：CD4-ζ CAR-T细胞能够归巢到感染部位且降低了部分患者体内的病毒载量，这些自体来源的CD4-ζ CAR-T细胞在体内持续时间至少可达11年，其半衰期大于16年，无明显的临床副作用。但是，早期的临床试验效果并非理想，主要是由于技术等方面的限制，例如体外一系列操作对T细胞损伤，以及CD4-ζ CAR中CD4是HIV感染细胞的受体，导致CD4-ζ CAR-T细胞易受HIV感染，加速其体内丢失。当前，进行其临床试验的CAR-T技术大都包含共刺激分子的多信号细胞内结构域（如4-1BB、CD28等）及抗体（如HIV广泛中和抗体等）来源的细胞外结构域，以增强CAR-T细胞的存活率、增殖率及杀伤目标细胞的能力并降低被HIV感染的机率。

此外，考虑到CCR5是HIV-1感染细胞的主要辅助受体之一，在HIV gp120与CD4识别后发生的构象变化中起到了至关重要的作用。有研究人员通过megaTAL基因编辑技术（联合了归巢内切核酸酶技术及TALEN技术的一种基因编辑技术）将CAR修饰的T细胞的CCR5基因敲除，来降低HIV对CAR-T细胞的感染率。体外实验结果显示：通过此基因编辑技术，CAR-T细胞的CCR5基因敲除率达到50%左右。与CCR5未处理组相比，其CAR-T细胞的HIV感染率大幅度降低。另外一种降低CAR-T细胞被HIV感染的策略是使CAR共表达HIV融合抑制因子（如maC46等）。

近期，一篇文献报道：研究人员将CAR技术应用于造血干细胞（HSPCs），结果表明CAR修饰的HSPCs在人源化小鼠体内能够成功分化为功能性CAR-T细胞及CAR修饰的NK细胞，这些分化来的细胞能够抵抗HIV感染，抑制HIV复制。此研究表明基于CAR-T的技术应用于干细胞来治疗HIV/AIDS 也许是可行且有效的。

另外，积极借鉴此技术在肿瘤治疗临床试验上的宝贵经验，进一步优化靶向HIV CAR-T技术是其尽快进入临床化的有效措施之一。（欢迎分享本文，转载请保留出处：微信公众号基因治疗领域）