脑声常谈：动物抑郁行为实验手册丨大小鼠强迫游泳实验测试方法与指标评价

强制游泳测试使用一个高 25至 50厘米、直径10至 30厘米的圆柱形水箱来容纳啮齿动物和小型灵长类动物。水箱中充满室温水，以防止对象将其爪子或尾巴接触到圆柱体的地板并防止逃跑。不透明的分隔器通常在水箱内使用，以允许多个受试者进行测试。

虽然可以进行实时评分，但建议使用视频和跟踪软件，例如VisuTrack动物行为分析软件（上海欣软），以避免评分不准确和差异。坦克必须有足够的照明以提高记录质量，并且可以使用白噪声发生器来掩盖可能影响主体表现的任何噪声。

(1)实验前调节测试箱内水温,水温应为 23 ~25℃ 。水深应根据动物体重进行调整,动物尾巴与测试箱底面保持一定距离。

(2)如同时进行多只动物实验,每两只动物间应用不透明挡板隔开。

(3) 大鼠强迫游泳实验,应在实验前1d预游,24h后进行强迫游泳实验。记录 5min内动物的不动时间、游泳时间及攀爬时间。

(4)小鼠强迫游泳实验，应在检测当天进行,小鼠游泳时间应为6min,记录后 4min的游泳时间、不动时间及攀爬时间。

评价指标应采用动物不动、攀爬、游泳三类动作的时间及次数进行判定。

(1)不动( immobility)：动物在水中停止挣扎,呈漂浮状态,仅有轻微的肢体运动以保持头部浮在水面。不动时间越长表明抑郁程度越重。正常小鼠不动时间在检测时间的 40% ~ 80%内;正常大鼠不动时间在检测时间的 30% ~ 70%内;抑郁行为判断标准:不动时间与对照组相比显著性增加(P<0. 05)。

(2)游泳(swimming)：动物进行流畅、协调的运动,动物四肢始终在水面以下。游泳时间和游泳距离越少,表明抑郁程度越重。

(3)攀爬( climbing)：动物四肢强有力伸出水面,并沿测试箱壁做剧烈的上下动作。5min检测期内,SD 大鼠攀爬时间 60 ~ 130s。攀爬时间越少,表明动物抑郁程度越重。

• 不同种系实验动物在 FST中表现不一样。瑞士小鼠对 作用于 5 -HT/NE神经递质系统的抗抑郁药物最敏感， 而抗抑郁药物对 DBA/2 小鼠无行为学效应， C57BL/6JRj品系小 鼠是唯一对安非他酮敏感的小鼠 。说明要做到研究结果的可比性， 必须选择相同种系的实验动物。

• 尽管实验用鼠品种相似， 使用客观评价标准， 实验动物 在 FST中表现仍有差异。

• 实验室内部标准与条件， 包括饲养条件、光照时间对研究结果都有影响。

• 在 FST中， 实验动物行为会受到水温影响， 在冷水中容易出现静止不动行为；相反， 在温度较高水中不动行为出现较晚。所以通常将水温设定在 23 ～ 25℃。

• 水桶内水的高度应当尽量保证实验动物的后肢不能支撑或者接触到水桶底部

• 计算动物绝望状态的行为，通常以动物的后肢是否活动为判断依据

• 实验时间不能太长，通常建议大鼠6min，小鼠5min左右

• 强迫游泳测试是由 Roger D. Porsolt 在 1970 年代后期开发的，作为一项简单的任务，用于评估和评估小动物中药物和化合物的抗抑郁特性。

• 该任务也被称为行为绝望或习得性无助任务，因为受试者成为表示绝望的固定体。

• 该任务使用一个装满水的圆柱形水箱，这样当对象被放入其中时，它无法到达地板或逃离水箱。

• 不动包括平衡身体和保持头部高于水面所需的任何行为。

• 时间采样技术将行为分为两种类型：攀爬和游泳。这种技术提供了一种方便的方法来量化逃逸行为。

• 当用抗抑郁药和其他化合物治疗时，不动行为会降低。