近来，在以罕见遗传病为代表的复杂疾病领域中，基因治疗策略逐渐成为现代医学的标准特征。而近期国内相继两款AAV基因治疗产品的IND申请快速获批，也意味着国产AAV基因疗法正走向与产业链相互促进、良性发展的快车道。与之前的获批产品不同的是，本次两款AAV基因治疗产品的获批建立在与基因药物CDMO企业的全流程合作的基础上。宜明细胞在以上项目推进过程中，提供了菌种库建立、GMP质粒开发生产、GMP AAV开发生产、方法学开发检测以及稳定性研究等，与基因药物研发企业实现了深度对接。长期以来，AAV因其免疫原性低、宿主细胞范围广、外源基因高表达等特点被广泛应用于基因疗法药物递送，但是克服AAV大规模生产以及纯化流程中的杂质风险仍然是实现这种突破性治疗模式全部潜力的关键挑战。为了基因治疗产品更安全、更快速的商业化并应用于临床，其在早期的生产制造及注册申报的布局策略至关重要。作为两款AAV基因治疗产品获批IND的重要参与者，宜明细胞拥有基于完善的产业化基地设施的AAV生产全流程的CDMO服务平台，其中包括菌种库构建、GMP质粒开发生产、GMP AAV开发生产、方法学开发检测以及稳定性研究等。其次，基于对AAV质量控制、法规监管体系、GMP平台建设及验证的深刻理解，雄厚的技术实力以及丰富的项目执行经验，宜明细胞可提供从Pre-IND的准备到注册三批次生产以及IND申报文件撰写的一站式全流程服务以及临床1/2期样品生产、商业化样品生产等。大规模AAV生产是基因治疗生产全流程的基石，GMP厂房设备及规模对项目成功产生重大影响。因此，在大规模AAV生产中，拥有放大工艺成功经验的CDMO合作伙伴将助力药物研发公司将研发项目转化到临床应用并推向商业化市场。近三年，宜明细胞分别在国内的济南、苏州基地建立GMP厂房，在海外加拿大建立CMC中心。其中今年3正式投入使用的苏州生产研发基进一步扩大了宜明细胞高品质CDMO平台的能力和规模。位于苏州工业园区的基地拥有近万平米的GMP厂房，符合国际一流标准的cGMP生产线数十条，宜明细胞自主研发的AAV包装系统，可以根据客户的需求，采用悬浮和贴壁两种不同的工艺进行病毒的包装。目前，宜明细胞能够实现原核发酵规模为10L-50L-200L，真核细胞培养规模按照客户不同需求可达到：50L-200L-500L-2000L，满足不同客户在基因治疗药物开发不同阶段的需求。
▲ 真核细胞培养的200L生物反应器（图片来源：宜明细胞厂房实拍）随着生产工艺的放大，在一致水平的前提下保证AAV产品的安全性、有效剂量变得更加具有挑战性，生产过程中对于AAV的特定质量属性的监控检测就尤显重要，包括空壳率、病毒感染滴度、宿主蛋白、病毒颗粒的聚集度等问题。AAV病毒载体的每一种血清亚型都需要特定的纯化方法，才能更有效的获得病毒。目前单步亲和层析捕获步骤已被证明可以达到相对高的纯度，但无法进一步降低杂质，同时无法有效分离空衣壳和完整病毒颗粒，因此额外的层析步骤必不可少。宜明细胞采用了两步柱层析法，首先利用亲和层析捕获病毒去除大部分杂质，再利用离子交换、切向流等工艺进行进一步纯化。另外，分离空衣壳的商业化生产工艺也亟需改进。宜明细胞为此打造了一个高精准度、全面的（可覆盖各个血清型）、可实现相互验证的AAV空壳率检测平台，实现了AAV一站式自主检测，降低空壳率检测成本并且极大地缩短了检测周期。
▲ AUC检测平台实操图（图片来源：宜明细胞厂房实拍）AAV目前的监管处于动态变化中，难以预测的生产需求使项目规划变得困难，而成本压力要求CDMO设施必须高效和满负荷运转。如何降本增效、最终使终端患者收益成为每个具有匠心的CDMO企业必须考虑的问题。在AAV基因治疗产品落地的过程中，宜明细胞的优势是采用C+A厂房设计标准，实现在绝对A级环境下的生产、灌装。相较于B+A厂房，整个运营成本大大降低，在保证GMP病毒质量符合国家法规要求的同时，提高罕见遗传疾病患者群体的可及性。整个AAV基因治疗产品全流程涉及定制化载体构建、质粒生产工艺开发、GMP质量管理体系搭建、供应链整合等多个领域，不仅需要大额资金投入，还需要CDMO企业在为药企提供创新药生产时所需的工艺流程研发及优化、配方开发及试生产服务经验，从而帮助更多研发型企业进行实际的技术转化，缩短产品上市周期，促进商业化。2022年第二季度初，宜明早期介入并深度合作助力两款AAV基因疗法步入临床，而这其背后离不开对整个产品早期临床阶段以及商业化市场供应开发策略的深远布局。凭借在病毒载体的多年的研发、生产经验，多批次GMP病毒产品的成功放行经验及技术积累，宜明细胞逐渐建立完善的AAV工艺质量体系。并不断促进开发新的工艺解决方案，降低成本，提高速度和质量。在积累国内成功申报经验的同时，宜明也在为国内AAV的FDA申报做准备，建立中美双报服务，宜明细胞的苏州制备基地完全按照符合NMPA和FDA、EMA规定的标准进行硬件建设，切实为客户进行多国（地）申报提供高效服务。宜明细胞未来始终秉承“让生命更健康，让世界更美好”的使命，全方位为药企提供临床样品的一体化CRO前端+CDMO解决方案，最终使更多疾病患者临床受益。
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